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转染试剂使用注意事项

细胞密度：转染DNA（质粒）时，细胞密度为80-100%，转染RNA(siRNA或miRNA)时，细胞密度为60-80%，具体细胞密度必须结合考虑核酸种类、转染试剂种类和细胞生长密度极限；

DNA用量：0.5-1ug/孔（以24孔板为例），具体用量根据转染效率检测实验确定；

RNA用量：10-30 pmol/孔（以24孔板为例），具体用量根据转染效率检测实验确定；

转染试剂的用量：转染试剂说明书推荐了一个使用范围，具体用量根据转染效率检测实验确定；

根据转染效率检测实验确定核酸的用量及转染试剂的用量（核酸与转染试剂的比例关系），转染效率检测实验一般在 内容过长，仅展示头部和尾部部分文字预览，全文请查看图片预览。 匀（三次，每次持续1秒），不可使用吹打均匀；混匀后均需短暂离心；

把稀释的核酸和稀释的转染试剂复合混匀时，应该把稀释的核酸加入稀释的转染试剂中（顺序不可调转）；加入后立即进行（不要耽搁）弹匀或颠倒混匀（稀释的核酸和稀释的转染试剂一旦复合，转染复合物的形成立即启动，如果不及时混匀，所形成的转染复合物的效率就会很低），先不进行短暂离心，待所有的管子复合完毕后，在一起进行涡旋点动混匀三次，每次持续1秒，然后短暂离心；

转染复合物孵育形成时尽量避光室温或37℃放置；

如果进行RNA转染时，尽量使用无酶及灭菌处理的耗材；

Opti-MEM用量参照转染说明书建议的用量；

表1：

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