高中生物「选修一」基础知识清单，高三复习提分利器！
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形式随尿排出，只Q囋谔囟XXXXX奶跫拢ㄈ缡手钡目鯥、温度和一定的b炆饔茫?才会转变成致癌物。
配制盐水：清水与盐的质虽比为旦，盐水要或沸冷却。煮沸的目的是灭菌除N?冷却是为了保证乳酸菌等微生
物的生命活动不受影响。盐有灭茵.渗出蔬菜中过多的术分以及调味的作用。盐水浓度不能太高，因为盐水浓度 太高会引起乳酸菌细胞渗透失牛 一 ’Z 一长}仕⑸踔恋贾氯樗峋劳觥?/p>
在冷却后的盐水中加入少量“陈菜泡液”，LI的是增加乳酸菌敬量.缩短泡菜割作时间。
加入调味料后要装坛密封（坛盖边沿水槽注水），目的是创造无| '条件，利用乳酸菌发酵。
泡菜中亚硝酸盐的含量与腌制时间、腌制温度和食盐用量有关°温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短,易某某 成细菌大量繁殖,使亚硝酸盐含量X椉?一般在腌制10d后,N溝跛嵫蔚暮靠枷陆怠?/p>
亚硝酸盐含量的测定
（1）方法：比色法。 （2）原理：在盐酸酸化条件下,亚硝酸料方法氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1- 蔡基乙二胺盐酸盐结合形成迭些色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目n,比较,可以 大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。（3）步骤：配制溶液一制备标准显色液。制备样品处理液f比色。
发酵过程中应定期测定亚硝酸盐的含量，原因是发徎不同时期亚硝酸盐含量会发生变化，及时测定是为了把握 取食取食的最佳时机。泡菜腌制过程中，亚硝酸盐的含量光增加后;成某某，故后i?定在z臢溗健?/p>
从开始制作到泡菜质量最佳这段时间，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加,杂ko数量减少, 原因是乳酸原比杂菌更耐酸。
专题2 的X胗XXXXX?/p>
课题I微生物的实验室培养
培养基按物理性质分为液体培养基和国体培养基,区别是固体培养基屮加入了凝固剂琼脂:按用途分为选择培养 基和荃型培养基。微生物可在些培养基表面形成肉眼听见的真签，固体培养某可用于微牛.物的分离、冬定、活 菌计数和保藏菌种。液体培养基可用于细菌的选择培养/可大培养/富聚培养,目的是增加目的菌的ka量。
各种培养基的具体配方不同，但一XX含有水，碳源' 氮源和无机盐。另外，培养基还需要满足微生物生长对 也、特殊营养物质以及氧■气的要求。如培养细ko（如乳酸菌）时需要在培养基中添加箜生重，培养霉菌（真菌）时需 将培养基的pH调至氐性，培养细菌T 需将pH调至中性或吸磁性,培养厌氧微生物时则需要提供冬的条件。
无菌技术的Q兊氖腔竦么烤慌嘌?关键是创造室条件，防止外来杂茵的入侵。
消毒和灭菌
（1） 消毒：用较为温和的物理或化二方法杀死物体表而或内部的部分微生物,不包括芽抱和抱子。
常用方法：煮滞消毒法:牛奶用巴项毒法,既杀死牛奶中微生物,又二牛奶中的营左成分不被破坏:用酒特擦 拭双手、豆气消毒水源是化学站割消京法:接种室、接种箱或超净工作台用一外线.消■法。
（2） 灭菌：用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽抱和抱子。
常用方法：灼烧灭菌：在火焰的充分燃房屋灼烧，可迅速彻依的火ko，如推种环、接种针.试管口、瓶口。
制备培养基的步骤：计算-称量-溶化一（调节￡?）-灭菌一倒平板。
（］）在溶化后灭菌前调节dH,若先灭?后调pH易污染培养r2。（2）培养基高压蒸汽灭菌,培养皿干热灭菌。
（3）平板冷却凝固后需倒孒,目的是防止皿盖上的冷凝水落入培养基中造成某某染。
微生物接种方法（分离纯化细菌方法）
（1） 平板划线法:通过接种环（工具）在琼脂固体培养基表面连续划培的操作,将聚集的菌种逐步稀掉分散到培葬 基表面。在数次划线后，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,即茵落。
均烧接种环目的：第一次灼烧：避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;以后每次划线前灼烧：杀死上次 划线,结束后接种环上残留的菌种，使每次虹线的苗种来自上次切戏,未湍;划线结束灼烧： 亲死■接种环上残留的菌种、避免细菌污染环境和感栾操作者。灼烧次数=划线次数+L
在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高杀死菌种。
每次从上一次划线的末端开始，目的是将聚笑的茵体逐步稀释分散到培养基.表面，以
使得到SX个茵;
（2） 稀释涂布平板法:用移液管（工具）和无菌水将菌液进行一系列的梯度稀懰,然后用
涂布器（工具）将不同稀择度的菌液分别均匀地涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。 平板划线法稀葬涂布平财
在柿译度足够高的ko液里,聚集在一起的微生物破分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的{嚶洹?/p>
梯度稀释原因：焙养液中菌体浓度高，直接培养很^分离得到单某某:目的：将聚集的菌体分散开，以便荻得单某某。
梯度稀释中，每次取样前需用手指轻压移液管j#皮头，吹吸三次，目的是使- 'UH节，■足令为匀。
涂布器浸在酒精中的主要目的是为涂布器的灼烧灭菌做准备;为保证菌液均匀分布，应在涂布时转动培养皿。 注：①以上操作均在鱼些匹典旁进行，防止杂茵污g6。②若要分离并统计活ko数，应选用稀终泠布平板法。
③平板划线法不能用于活菌计数的原因是苗落连成.片’无法计数。
菌种保藏：频繁使用的菌种用临时保藏法（4C冷藏室）,但保存时间不长，因为菌种易被污染或产生变异；?坨
期保存的?种用甘油管藏■法（-20C冷冻箱）.
课题2 土X手蟹纸饽蛩氐南妇姆掷胗爰剖?/p>
在自然界寻找11的?：要根据II的菌对至竺岌的要求，到和应的环境中去豆找。实验室目的惆株筛选原理：人
加？供 fl f-'l J? " .Ki'i'J ‘Kfl（ f H卉 '? . I-MJ - ； ! JI他P锏纳?amp;
选择培养基：允许拄旦玉的微生物生长，同时土4蛀其他种类微生物生长的培恭站。
例如：以址为唯一抵源的培养基可筛选出尿素分解菌：以鱼业为唯一■碳源的培芥基可筛选出纤维素分解菌: 以石某某为唯?碳源的培弃基叮筛选出石汕分解??：缺乏有机碳源的培养基町筛选出JL厘兰些：缺乏}源的培弃 基可筛选出卩，：N"生灼:加入抗生素的培养基可筛选出T 时芋' 等fl倘。
微生物计数方法
（1） 稀释涂布平板法（活?计数法）
原理：当样品的稀作度足够啬时,培恭基表面生长的一个曲?落，来源于样品稀廄液中的一个活所。通过统计平 板上的诃落敢,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
原则：设置M又纽,同一稀释度下至少涂布N个平板，增强实验说服力和准确性：重复组结果应一致.
为了保证结果准确，?■般选择好溶数在3（） 30（）的平板进行计数。
计算公式：每克样品中的圫株数=（C： V） XM（个/mL）。其中，C代表某一稀料度下平板E生长的十均茵落出 V代表涂布平板时所用的稀释液体枳（nil ） （ ?般为（）ImL）, M代表稀释倍数。
结果：统计的?落数往往比活ko的实际数I以低，Xi因足直e笕势叨嗳氏赴谝弧籗}土上削祭到的NB疋二仝竹方。
-'"妇技 一 " .竹”"「I ?"!. i 丨:切记 ? ? ?
（2） 显微镜宜接计数法
主要用其：虫竺也二竺和虹登京
血细胞计数板使用方法：“先一N后涌再吸”,即先婭v洳Ｆ蟮闻喙XXXXX海?/p>
再用吸水纸吸。
计算公式：ImL培养液屮细胞个数=小方格中细胞平均数X400 X 10」X
稀稼倍数（个/mL）
结果：估算值比实际值偏大,因为该方法不能区分如胞的死活，计4%到 的细』也数包括了些亡如细胞数。
实验流程：土X嗜⊙?样品稀掉一涂布培养与观察一计数。
（1） 土壤取样：土壤有“微生物的天然培养基”之称。土壤取样时应选取取富含Q嚮省H接近屮性IL洋湿的、 距地表约 口￡虬的土壤层。取一定枯土溶于无符水中,制成土壤溶液。
（2） 将样品进行拼，度稀释：样品稀伴度宜接影响平板上生检的菌落数H。用一定稀释范围的样品液进行涂布培养， 以保证获得菌落数在30?300之间、适于计数的平板。测定细菌数量一般选用10」、10’和10“O断∈鸵?测定放 线a愂纫话阊∮肐。'、1（）'拍1（）'倍稀精液,测定立曁数量一般选用1（）：、10’和1（）’倍稀释液进行平板培养。
（3） 培恭与观察：不同种类的微生物，往往需要不同的也丝度和业L。将样品途N櫟焦烫迮嘌砻妫荒苡闷?板划线法。为防止皿盖上的水珠滴入培养必造成某某染，需将培枷呈例直状态放乩 俗隔24h统计一次曲落数目， 最后选取忻迷比I」W时的记录作为结果，这样可以防止西妇策时间不K而字性己沔为话的尃日° 一般来说，在一 定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的茵厬拄色，这些特征包括苗落的形状、大小、降起程度和顾某某等方而。
（4） 计数：￥亘盛*土L时，取同一也虺卜至少土个平板进行计数，求出平均仿,并根据所对应的也也计 算出样品中细菌的数目。用记号笔标记培养皿中r>落时，应标记在皿底。
大我l柍蓵w.仲V -尤茵去的培养基（空白对照）上仃苗落生长，说明培奔琏被杂菌污染。
牛肉uv蛋白伾培恭基上的晳落的堂主些远大于选择培恭基时，说明选择培养基JL仃林选作用。
分解尿素的细菌合成的工能将尿素分解为色，使培养珏的xO*增强,pH生上在以尿索为唯■?幪源的选择培 斜E中加入酚红指示剂（鉴别培挥基）培弗细斜若pH升高，指示Rd将变空，可初步确定该种细晳.能够分解尿素、
伊红美蓝培恭基届算别培养基，大肠杆曲代谢产物会和伊红、能蓝发冬反应，使菌落呈现义色。
课题3分解纤维素的微生物的分离
纤维素是?种多糖，其组成单位.是为ij幻杯"纤维素酶是?种篆公O?它至:少包括：.种纟II.分，IIUC,.^.
荀萄摧昔h潯＜槲履衬?&暨纤维二|XXXXX祻璄吃，“羊
纤维素分解菌的简选方法是刚轮红束色法。刚果红（简称CR）是?种染料，能与纤维素?形成红色贝个的,当纤维
素被分解后，培养基中会出现以纤维索分解茵为中心的透明川， i的址可反应如{嚱到庀宋氐哪芰XXXXX?/p>
实验流程：土壤取样一选择培养一梯度稀释一噁样晶涂布到饕R%纤维看分\菌的培养戒上一挑选产生也堕的?落。
（1） 土壤取样：选择纤维素含董f富的土壤环境懫集土祥。取一定量土溶于鱼驻中，制成土X嗜芤骸?/p>
（2） 选择培养（扩大培养/富聚培养）：以纤维索为唯?碳源的培养基，根建培养基（物理性质）、些培养基（用 途）。选择培养的II的是咽加目的苗浓度:振荡培养的11的是X椉优嘌褐腥芙馊∩崃浚竦拇绨段镏实睦寐省?/p>
（3） 梯度稀释：I」的是使纤维索分解蔺分散开、以便能够得却单细胞{嚶洹?
（4） 涂布培奔：用同体培择炫（物理性质）、鉴别培养基（用途）。为防止皿盖上的水珠滴入培养S蜭 成某某-加需将培养皿呈倒近状态放置。此步也可用平板划线法。
（5） 筛选菌株：挑选产生透明阁的菌落。透明W越大，说明钿苗分解利用纤维素的能力越强。（如图）
以些盍为唯一碳源的逃连培养基可初步筛选出纤维素分解I札为进?也确定得到的是}维素分解 ?，还需要进行吸尅产纤_7*:}!实验。纤维素椰的发慣方法仃汲体发M和固体发酵两种。
专息4r>的研究与应用 课题1果胶酵在果汁生产中的应用
L果胶：（】）作用：组成植物竺些以及她1星的主要组成成分之一。
（2） 成分：由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物。
（3） 特点：不;咨干水。在果汁加工中，果胶的存在易导致果汁虹性低,果汁浑浊。
果胶酶：（1）来源：也也愾、酣母苗和细苗均能产生果胶酶。食品加工业中的果胶酶是由塞茵发酵生产的。
（2） 作用：①将不溶性的果胶分解成可溶性的土功些也使浑浊的果汁变得尘心
瓦解植物细胞的色此里和胞间使榨取果汁变得更加容易，提高出汁车。
（3） m成：是分解果胶的-类醵的总称，包括多h“:怕投，？、无匚；广■%、空地1等。
（4） 化学本质：果胶酰是■白某某,能被耸白怫水解虬
前的活性与影响曲活性的因素
（1） 酶的活性：①概念*指＜俳化一定化学反应的能力。
②表示方法：酶活性的高低可以用在-?定条件下，愉所催化的某一化学反应的反应—表示。 Ej尺成速况的&小万某某：用单位时间内、单位体积中反应江的减少量或产物的n 来夜小。
（2） 影响陋活性的因素?： 业、迎和堆的抑制剂等。
实验设计
【实验 】探究温度（pH）对愀活性的影响
（1） 实验变量：自变量：温度（pH）： 因变量：啊的活性:
无关变量：一泥用m 股胶响的已度和用话.质应时间、过滤T 间.nH（温度）{H。
（2） 操作方法：在不同温度（Ml）下,将一定量的里些安加入一定量的坦蜃中，反应同样长T 间,再将反应液丝 m)同样长的时间，用站筒n,/滤出的果汁的体积。
注：①探究温度对酶活性影响时，在果泥和果胶酶混合之而，将它们分装在不同的试管中恒温处理，可以保证底 物和酶在混合时的服度是相同的、避免了果泥和果■胶柎"时影响混念物的温/史，从而影响黑胶酶活性。 ②探究温度（pH）对悔活性的影响时，不同的温度（pH）梯度之■间就可以布为和妇""
（3） 判断果胶酣活性高低的方法
测定单位时间内产生果汁的体积（或出汁率）来判断。获徂的果汁越多，说明果胶福的活性％a。
比较果汁的没?m磁卸瞎闼幕钚浴９匠吻澹?amp;明果胶物的活性越汛
【实验二】探究果胶械的用量：
（1） 实脸变量：自变量：悔的用辱:因变Q ：条汁体积:无关变量：果汜用：ih反应时问、泄（、nil等。
（2） 判断果胶前用量是否合适的思路
如果随着酶的用虽X椉?过滤得到的果汁体枳也X椉樱得髅傅拇舜XXXXX?
当海的用量X椉拥侥掣鲋岛螅稍黾雍５挠昧浚说玫降墓奶寤嗽俑囊?说明酶的 用堆己经足够，那么，这个值就是酶够适且童。
课题2探讨加酶洗衣粉的洗涤效果
1 .加酶洗衣粉
（1） 概念：加《洗衣粉是指含有酶制削的洗衣粉。
（2） 舔制剂
①常用种类：?白某某、脂肪酶、淀粉佽和纤维索酬四类。
2应川bU广泛、效果最明显的种类是：残性蛋白酶和城性脂肪酶?
作用原理：陋制剂能将难溶性大分子物质分解为”""SD小宜也，,使污迹易从衣物上脱落。如碱性蛋门防能 将血渍、奶渍中含有的大分子蛋白某某水解成nJ■溶性的u`基性或小分子哒，脂肪佽将脂肪水解成甘油和脂肪腴。
影响醐活性的因素：遇旦、地岌和，面活性荆。
生产方式：通过目工择生产出能够时骸' 些、忍受表面治性剂和4、有温生的^_°
（3） 优点：丿川酌洗衣粉降低r牛;,汁":和 的川仙..，使洗n利啊飞的方向发展，威小# _的
污染。普通洗衣粉中含有磷，含色污水的排放可能导致一物和江法的大靴繁殖.造成水体的*（富营养化）。
实验设计
【问题11曾通洗衣粉和加％洗衣粉对衣物污渍洗涤效果的区别
变批分析：自变化 洗,M扮的地 I天I变也 冼
对照实验：对照组：悴通洗衣粉+lZ染物；实裁组：加薛洗衣粉+lZ染物。
（2） 常用方法：包括包某某、化学结合法和物理吸附法。一般来说，酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定 化，而细胞多采用也也法固定化,这是因为3a大■一的细胞岸以被吸附或结合，而体枳" ，七勺丿三5；+中涓出。
优点:成本低，易某某，对藤活性影响小，能固定一系列酶，催化一系列反应。
缺点：只能以小分子物质作为反应询,大分子物质不易进入细胞，反应时需要为固定化细胞提供营养物质。
（4）载体：本课题使用包某某来固定细胞,即将微生物细胞均匀地包某某在不溶于水的多孔性载体中。常用的载体 有明胶、琼脂搪、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。本实验选用海藻酸钠作载体包某某酵母细胞。
4.固定化慣母细胞的实验操作
（1） 制备固定化酵母细胞
酵母细胞的活化：向干酵母中加入蒸P+水.调成糊状，使其活化。
注：活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。
配制国N溶液：浓度为头徔N。
配制海藻成钠溶液:溶解海藻酸钠采用酒特灯加热,边加热边某某。加热时要用小火,或者间断加热,反复几 次，直到完全溶化。如果加热太快，海藻酸钠会发生焦某某。海藻酸钠溶液采用高压蕉汽疋曲法灭菌。
海藻酸钠溶液与酵母细胞混合:向灭菌后冷却至室渔的海藻酸钠溶液中加入已活化的酵件细胞,进行充分搅拌, 使其混合均匀，再转精至注射器中。
注：“冷却至室温“的目的是防止（海藻酸钠溶液）是度过高而导致醇母菌死亡.
固定化酵母细胞：以恒定的速度安1地将注射器中的溶液滴加到配制好的￡坐溶液中，观察液滴在CaCh溶 液形成d慕褐榈那樾巍＝庑┠褐樵贑aCI」容液中浸泡通血_左右。
注：CaCh作用；使海藻酸钠胶体聚沉,以言彬戒结构稳定■的嶷胶珠.“浸泡30min”：使及胶珠结构更稳定。
（2） 用固M化酵母细胞发酵
固定好的酵母细胞（凝胶珠）用蒸馅水冲洗2?3次，加入到用于发酵的的的萄|芤褐?于25T下密封发酵24h。 注：“冲洗“的目的：洗去凝胶珠上多余的CaCIN溶液，防止}q脱珠硬度变大影响其通透性，对实验造成影响。
葡萄健溶液作用：既作为反应物，又为用母备提供营养物质.—
固定化酵母细胞实验操作的结果分析与评价
（】）如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏彳氐,固定的酵母细胞数II较少:如果形成的凝 胶珠不是囤形或鸣园形,则说明海藻酸钠的浓度偏3,制作失败，需要再做尝试。可以制备不含酵母细胞的晈胶 堡作对照。 . 6.
2.
（2）利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，凹以看到产生了很多气泡,同时会闻到其味,而不含酵母菌的凝胶珠所 做的对照组实验则无此现象。
如果希望反复使用固定化酵母细胞，就需要避免其他微生物污栾,实验中用到的仪器、溶液需消毒灭菌，如CaCh 溶液、海藻酸钠溶液'需 灭iWo在I：业生产中.细咆的固定化是在:严格 的条件F进行的。
专题5 DNAJlg白某某技术
课题3血红蛋白的提取和分离
蛋白某某分离的理论依据：蛋白某某各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性 质和对其他分子的亲和力等,可以用来分离不同种类的蛋白某某。
分离蛋白某某的方法
（1） 凝胶色谱法
概念：也称做分配色谱法,是根据牛： f的大小分离蛋白某某的
有效方法。
凝胶：是一些微小的多孔球体,这些球体大多数由多糖类化合物构成, 如葡聚團或琼脂糖。在小球体内部有许多贯穿的通道。
原理：当相对分子量不同的蛋白某某通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋 白某某签位进入凝胶内部的通道，路程琶王，移动速度密，通过凝胶的时
相对分子 质量较小 的喭白某某
4.
的蛋白某某尸
间较长;相时分子质量较大的蚩白某某无法进入d旖耗诓康耐XXXXX?只能在凝胶外部移动，路程尝，移动速度n快, 通过凝胶的时间些。因此可将各种相对分子质量不同的蛋白某某分子分离。（原理见右上图）
分离过程：蛋白某某混合物上柱?洗脱一大分子流动快、
（2） 电泳
概念：指雇"『在电场作用下发生迁移的过程。
原理：在一定的四下，多肽、核酸等生物大分子的 可解离某团会带上正电或命电,在电场的作用下，这些 带电分子会向着与其所带电荷地的电极移动。
影响电泳速率的因素：待分离样品中务种分子带电性 质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分 子产生不同的兰W，从而实现样品中各种分子的分 离。带电性质决定迁容方命,分子大小决定迁丘迭度。
小分子流动慢f先收集大分子i后收集小分子。
^/电性质、分了大小和形状的不同，使分了迁移速度不同 明极加入待分离的样品 阳极
电庶仪
“ ，/—— ■ 1 3脂胶
分r向}:极移动缓冲擀液支持胶体的玻璃板
凝胶电泳原理不意图
方法：常用的电泳方法有琼脂|旱缬竞徒０吩平河捎尽?/p>
琼脂糖凝胶电泳：由于琼脂糖本身不带电荷，所以，各种分子在电场屮的迁移速率取决于各种分子所带电荷性 质的差异及分于某某.形状的不同,从而得以分离。
聚丙烯酰胺凝 内容过长，仅展示头部和尾部部分文字预览，全文请查看图片预览。 些虫装尫,II的是阮止加批时Q囋美臃?W字致尊巩故金某某 莘取液的浓缩可宜接使用
色装?L浓缩的目的是将冿取剂与阴萝|、穴分开（或去除英取刮）＜■浓缩前还要进"朸上 其II的是除去萃取液 也'、.m 该实验坡终将在空装置的N也中收集到胡妙卜某某粗品。
io.对胡某某I、素粗m的临；r不用-■'1' ，原理是：不同色素在卜析液中的溶解度不同，溶解度高的随屡析液在滤 纸上扩枚得快.反之则慢。装置中玻璃湍的作用是防止长折液押发:层析液不仰没及样品原点，以免色素溶解
出水
于层折液中，使鉴定失败。用最细的注射器针头在基线上A、D点点承?样品,B、C点点提取楼品。 山样应快谑和玫,点样后在基线上形成知小的\〉悖⒁獗３致酥叫浴Ｈ羰笛楹缶偃⊙烦鱿趾?标准样晶姓于同-水平的色"％说明苹取佯'"卩公计胡浒卜某某，提取胡妙卜索的实验电边。
进水口
丁F烧瓶
?水浴锅
-酒精灯
铁架台
萃限装置
玻璃盖
色?容器
滤纸 U型扣 样品原点 溶Rd（常用 石某某） 纸层析装置示意图
昼准右S沃鵪.
卩-妍誓卜某某
I-K?他色素我杂质
胡妙卜某某的纸层杨某某■示意图
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