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核酸的定量和纯度鉴定（DNA含量测定）
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核酸的定量和纯度鉴定（DNA含量测定）
一、纯度测定
紫外分光光度法：此法要求核酸纯度很高 260nm
1个Abs相当于50μg/mL双螺旋DNA，除了定量测定以外，还可进行核酸纯度检测。
A260/A280 纯DNA 1.8 纯RNA2.0
若样品中含有蛋白质和苯酚时，A260/A280比值降低，小于 1.8混蛋白质，大于1.8混RNA
二、定量测定
定糖法
内容过长，仅展示头部和尾部部分文字预览，全文请查看图片预览。 呤碱
脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸， 而z-脱氧核糖在酸性条件下，加热脱水生成w-羟基-Γ-酮基戊糖，与二苯胺试剂反应，生成蓝色物质，在595nm波长处有最大吸收。DNA在40~400μg范围内，光吸收与DNA浓度呈正比，在反应液中加入少量乙醛，可提高反应灵敏度。
容白管某某，对照管作对照，测定的样品的吸收值要在标准曲线测定范围内。二苯胺具有腐蚀性，操作时 ，应防止从比色皿中洒出，同时，生成的蓝色物质不易褪色，应注意。
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