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产品简介 本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取多种细胞 中的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为一种新型材料,高效、专一吸附DNA, 可去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可 靠。 使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、 Southern杂交等实验。 提取得率 材料 贝类组织 虾组织 鱼类组织 建议孵育时间 0.5 h 1h 1h DNA得量 12-20 μg 8-14 μg 15-40 μg 产品特点 简单快速:1h内即可获得超纯的基因组DNA。 广 泛:适用于多种动物细胞和动物组织等。 超 纯:获得的DNA纯度高,可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。 注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 1. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。 2. 若缓冲液GA或GB中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解,摇匀后使用。 3. 所有离心步骤均为使用台式离心机,室温下离心。 操作步骤 使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。 1. 切取不多于30 mg的组织材料,放入装有200 μl GA 缓冲液的离心管中,涡旋振荡15 sec。 注意:根据提取的组织不同,起始量也稍有不同,腮的细胞量较大,一般建议提取量不 超过20 mg。 如果需要去除RNA,可加入4 μl RNase A(100 mg/ml)溶液(客户自备,目录号: RT405-12),振荡15 sec,室温放置5 min。 2. 加入20 μl Proteinase K (20 mg/ml)溶液,涡旋混匀,简短离心以去除管某某内壁的水珠。 在56℃放置,直至组织完全溶解,简短离心以去除管某某内壁的水珠,再进行下一步骤。 注意:不同组织裂解时间不同,通常需0.5-2 h即可完成。扇贝组织0.5 h基本可裂解完 全,虾和鱼类组织1 h。每小时振荡混合样品2-3次,每次振荡混匀15 sec。 3. 加入200 μl缓冲液GB,充分颠倒混匀,70℃放置10 min,溶液应变清亮,简短离心以去 除管某某内壁的水珠。 注意:加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀,一般70℃放置时会消失,不会影响后续实 验。如溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不 纯。 4. 加人200 μl 无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,简短离心以去除管某某 内壁的水珠。 5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中), 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中。 6. 向吸附柱CB3中加入500 μl缓冲液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。 7. 向吸附柱CB3中加入600 μl 漂洗液PW (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。 8. 重复操作步骤7。 9. 将吸附柱CB3放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g)离心2 min,倒掉废液。将吸附柱 CB3置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。 注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留会 内容过长,仅展示头部和尾部部分文字预览,全文请查看图片预览。 收集管(2 ml)(Collection Tubes 2 ml) 50个 DP324-03 (200 preps) 50 ml 50 ml 52 ml 50 ml 60 ml 4×1 ml 200个 200个 选配试剂 RNase A(100mg/ml)(目录号:RT405-12) 储存条件 该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于 2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时 间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀。 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。 [文章尾部最后300字内容到此结束,中间部分内容请查看底下的图片预览]请点击下方选择您需要的文档下载。
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